紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見(jiàn)光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的 結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量。
影響紫外分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的主要因素有以下幾個(gè)方面:
?、?儀器的雜散光大小。
② 儀器的光度噪聲。
?、?儀器的基線平直度。
④ 儀器的光譜帶寬。
?、?試樣的來(lái)源, 包括樣品的制備, 取樣的方法。
?、?樣品的制備, 包括稱量、容量、溶劑、試劑、pH 值、時(shí)間、溫度等。
?、?比色皿的性能等。
由此可知, 光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 是一個(gè)綜合性的技術(shù)指標(biāo)。要使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù), 必須注重上述幾個(gè)方面的影響。否則, 不可能得到準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)。特別應(yīng)該指出的是, 在給出吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) , 同時(shí)也給出透射比誤差TA ( 或ΔT) 時(shí), 二者不能相互矛盾。